更新時(shí)間：2025-11-22
| 中文名稱(chēng):人黑色素瘤細(xì)胞M14 | 英文名稱(chēng):M14 |
| CAS:2750-76-7 | 品牌: 雅吉生物 |
| 產(chǎn)地: 上海 | 保存條件: 無(wú)血清凍存液 |
| 純度規(guī)格: 99% | 產(chǎn)品類(lèi)別: 細(xì)胞 細(xì)胞系 |
| 貨號(hào): YS2424 | 是否進(jìn)口: 是 |
| 用途: 科研實(shí)驗(yàn) | 產(chǎn)品規(guī)格: 1*10^6/T25 |
| 別名: K1 |
產(chǎn)品名稱(chēng)：人黑色素瘤細(xì)胞M14
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 | ||
培養(yǎng)備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過(guò)渡培養(yǎng) | ||
人黑色素瘤細(xì)胞M14到貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話(huà)，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基）
人黑色素瘤細(xì)胞M14培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶(hù)收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人黑色素瘤細(xì)胞M14部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS2350PANC02小鼠胰腺癌細(xì)胞PANC02
YS2351CT26WT/LUC小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞帶熒光素酶CT26.WT/LUC
YS2352B16/LUC小鼠黑色素瘤帶熒光素酶B16/LUC
YS2353SW10SW-10小鼠神經(jīng)元細(xì)胞
YS2354AT3AT-3小鼠乳腺癌細(xì)胞
YS2355OKT3小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗CD3)OKT3
YS2356MOVAS小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞MOVAS
YS2357EpH4Ev小鼠乳腺上皮細(xì)胞EpH4-Ev
YS2358M1小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)M-1
YS2359mIMCD3mIMCD-3小鼠腎髓質(zhì)細(xì)胞
YS2360GC2spg小鼠精母細(xì)胞GC-2spg
YS2361M5076小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤M5076
YS2362B16F0小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16-F0
YS23634T1/GFP小鼠乳腺癌細(xì)胞帶綠色熒光4T1/GFP
YS2364B16/GFP小鼠黑色素瘤帶綠色熒光B16/GFP
YS2365G422/GFP小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株帶綠色熒光G422/GFP
YS2366MFC/LUC小鼠前胃癌細(xì)胞帶熒光素酶MFC/LUC
YS2367LLC/GFP小鼠肺癌細(xì)胞帶綠色熒光LLC/GFP
YS2368B16/RFP小鼠黑色素瘤帶紅色熒光B16/RFP
YS2369RAW2647/RFP小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞帶紅色熒光RAW264.7/RFP
YS2370293人胚腎細(xì)胞293
YS2371293A人胚腎細(xì)胞293A
YS2372F9F9小鼠畸胎瘤細(xì)胞/小鼠胚胎癌細(xì)胞
YS2373H9c221大鼠心肌細(xì)胞H9c22-1
YS2374MXY9KMXY9K[NBL-2]犬腎細(xì)胞
YS2375P3X63Ag8P3X63Ag8小鼠骨髓瘤細(xì)胞
YS2376HPNE人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞HPNE
YS2377MC3T3E1Subclone24MC3T3-E1Subclone24小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞
YS23783T6Swissalbino3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
YS2379Psi2DAPPsi2DAP小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
YS2380SKNBE2SK-N-BE2人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
YS2381L5178YTKclone372CL5178YTK+-clone3.7.2C小鼠淋巴瘤細(xì)胞
YS2382PEDPED豬內(nèi)皮細(xì)胞
YS2383CV1[PartoftheWistarSpecialCollection]CV-1[PartoftheWistarSpecialCollection]非洲綠猴腎細(xì)胞
YS2384VEROC1008VEROC1008[VeroE6]非洲綠猴腎細(xì)胞
YS2385HifiveBTITN5B14Hi-fiveBTI-TN-5B1-4昆蟲(chóng)細(xì)胞
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