產(chǎn)品名稱：人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）BT20

人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）BT20收到后處理

細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基）

人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）BT20培養(yǎng)步驟

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。

三、細(xì)胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請參考我司貨號：C7001）

1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；

4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃

人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）BT20部分相關(guān)細(xì)胞如下：

YS1514NCIH1781人細(xì)支氣管肺泡癌細(xì)胞NCIH1781

YS1515NCIH1581人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1581

YS1516HBEC5i人大腦內(nèi)皮細(xì)胞HBEC5i

YS1517HuNS1人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞HuNS1

YS1518RL人B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞RL

YS1519MD人脾細(xì)胞MD

YS1520RC人B淋巴瘤細(xì)胞RC

YS1521SW684人纖維肉瘤細(xì)胞SW684

YS1522PhoenixECO人逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系PhoenixECO

YS1523BICR3人舌鱗狀細(xì)胞癌BICR3

YS1524OE19人食管癌細(xì)胞OE19

YS1525SNU601人印戒細(xì)胞胃腺癌SNU601

YS1526SNU1066人喉鱗狀細(xì)胞癌SNU1066

YS1527SNU46人喉鱗狀細(xì)胞癌SNU46

YS1528MNT1人黑色素瘤細(xì)胞MNT1

YS1529HARSpondin1FcHEK293Tcells人穩(wěn)定表達(dá)RspoI蛋白的293T細(xì)胞HARSpondin1FcHEK293Tcells

YS1530MUGChor1人骶骨脊索瘤細(xì)胞MUGChor1

YS1531SNU899人喉鱗狀細(xì)胞癌SNU899

YS1532SNU1076人喉鱗狀細(xì)胞癌SNU1076

YS1533TK6人成淋巴細(xì)胞/遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥TK6

YS1534LUDLU1人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞LUDLU1

YS1535UMChor5人顱底脊索瘤細(xì)胞UMChor5

YS1536MP46人眼葡萄膜黑色瘤細(xì)胞MP46

YS1537NCIH187人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH187

YS1538MOLT3人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞MOLT3

YS1539LL97A(AlMy)人肺成纖維細(xì)胞-原發(fā)性肺纖維化LL97A(AlMy)

YS1540SW962人外陰癌細(xì)胞SW962

YS1541SW872人脂肪肉瘤細(xì)胞SW872

YS1542NALM1人慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞NALM1

YS1543NCIH2030人肺腺癌細(xì)胞NCIH2030

YS1544Loucy人急性T淋巴細(xì)胞白血病Loucy

YS1545NTERA2人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞NTERA2

YS1546HCC1395人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）HCC1395

YS1547SKNO1人急性髓系白血病細(xì)胞SKNO1

YS1548NTERA2clD1人睪丸癌細(xì)胞NTERA2cl.D1

YS1549Huh1人肝癌細(xì)胞Huh1

YS1550HCC1806人乳腺鱗狀癌細(xì)胞（三陰性）HCC1806

YS1551OCILy7人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞OCILy7

YS1552HCC1954人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞TNMIIA期，3級/products/crl-2338HCC1954

YS1553BT20人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）BT20

YS1554LAPC4人前列腺癌細(xì)胞LAPC4

YS1555OPM2人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞OPM2

YS1556SUDHL8人B細(xì)胞淋巴瘤SUDHL8

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